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蛋白A磁珠的介紹

2025-09-15 [85]

蛋白A磁珠是一種基于蛋白A與免疫球蛋白Fc段特異性結合原理設計的磁性微粒,廣泛應用于抗體純化、免疫沉淀(IP)、共免疫沉淀(Co-IP)等生物化學和分子生物學研究領域。以下是對蛋白A磁珠的詳細介紹:

一、基本原理

蛋白A磁珠的核心成分是重組蛋白A,它能夠特異性地結合多數哺乳動物IgG的Fc端(如小鼠、人、兔、豬、犬和貓等)。每個蛋白A分子可結合多個IgG分子(通常為5個),從而實現對抗體的高效捕獲和純化。磁珠本身具有超順磁性,在外磁場作用下可快速分離,撤去磁場后易于分散,便于實驗操作。

二、物理特性

  1. 粒徑:通常為納米級(如200nm)或微米級(如1μm),具體取決于產品設計和應用需求。

  2. 比表面積:納米級磁珠具有超大比表面積,便于快速結合抗體或抗體復合物。

  3. 磁響應性:超順磁性設計確保磁珠在外磁場作用下快速分離,且撤去磁場后無剩磁,易于分散。

三、核心優勢

  1. 高容量:結合容量高,每次實驗的樣品用量更少。

  2. 低非特異性結合:穩定的預封閉磁珠設計可減少非特異性吸附,提供高純度的產物。例如,在免疫沉淀實驗中,洗脫的抗原中不含來自復雜細胞裂解物的污染性蛋白。

  3. 高效分離:磁珠可消除樹脂損耗,與僅使用離心管的傳統IP方法相比,分離效率更高。

  4. 兼容性:兼容手動和自動化操作(如Thermo Scientific KingFisher儀器),適用于高通量工作流程。

四、主要應用

  1. 抗體純化:從血清、細胞培養物上清液或腹水中純化抗體。

  2. 免疫沉淀(IP):捕獲細胞或組織提取物中的抗原-抗體復合物。

  3. 共免疫沉淀(Co-IP):研究蛋白質相互作用網絡。

  4. 其他應用:如抗原表位分析、蛋白質復合物純化等。

、注意事項

  1. 避免離心:離心可能導致磁珠聚集,降低結合能力。

  2. 避免干燥:磁珠干燥可能導致不可逆的損傷,影響實驗結果。

  3. 儲存條件:通常建議在2-8℃下儲存,避免冷凍。

  4. 單次使用:多數蛋白A磁珠設計為單次使用,重復使用可能影響實驗結果。

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